无菌均质器在一次性使用卫生用品检验中的应用

以纸质为原料的一次性使用卫生用品,例如纸巾、妇女经期卫生用品、尿布等卫生标准均有细菌数检测指标,在质量抽检中为必检项目。含菌量检验方法是依照GB15979 - 2002《一次性使用卫生用品卫生标准》"规定执行,其检验样液的制备是采用生理盐水稀释法。操作中将检样剪碎后加入到无菌生理盐水中,充分混匀和稀释接种培养,对其含菌量进行活菌计数。但这种处理方法经常会造成检测结果不一致,菌数波动较大。本研究引进食品微生物检测中的均质器法,用均质器进行一次性使用卫生用品的样液制备,同时与稀释法作平行比较。

1材料与方法（那艾-拍打式无菌均质器-NAI-JZQ）

1.1试验材料

试验样品为5种纸巾,每种纸巾分别准确称取10 g ,每种6份,装入牛皮纸袋内经160℃干热灭菌2 h后备用。

主要仪器有拍击式均质器,GRX - 9073A型热空气消毒箱,全自动压力蒸汽灭菌器和高压消毒器和洁净工作台。

试验菌株为大肠杆菌(ATCC 25922),培养基用营养琼脂培养基和乳糖胆盐发酵培养基,稀释液为灭菌生理盐水。

1.2试验方法

1.2.1菌悬液制备将大肠杆菌传代培养,取第3代营养琼脂培养基斜面新鲜培养物,用5 ml灭菌生理盐水将菌苔洗下,充分混混后制备成试验浓度的菌悬液。

1.2.2检样制备用灭菌生理盐水将实验菌液稀释

至103 ~103 cfu/ ml不同含菌量的菌悬液,以常规活菌计数法测定含菌量。将各纸巾检样分为A、B组，每种每组3份,在每份检样中滴染不同浓度菌悬液l ml,在无菌室内自然晾干,备用。

1.2.3检测方法①生理盐水稀释法:将B组染菌检样剪碎后加入到200 ml灭菌生理盐水中,充分混匀,制备成生理盐水样液。取样液1 ml接种无菌平皿,倒人冷却至45℃的熔化的营养琼脂培养基15~20 ml混合均匀。待琼脂凝固后翻转平皿置37℃培养48 h,观察结果,计数平板菌落数并计算出细菌总数。均质器处理法:将A组染菌检样剪碎后加入到200 ml 灭菌生理盐水中,用拍击式均质器拍打1 ~2 min,制备成生理盐水样液。按上述方法接种培养。③结果计算:要求每个平板上菌落数在30~300 cfu/平板之间,按以下公式计算结果:细菌总数=平板菌落数×稀释度。

2结果

统计分析结果表明，在检样含菌量高于103cfu/ g情况下,采用均质器处理法检测出细菌数比生理盐水稀释法检测更接近实际菌数,两种方法的检测结果有显著统计学意义(P<0.01)。随着检样中含菌量的增加,生理盐水稀释法的检测结果较实际含菌量明显偏低(表1)。

3讨论

经对5种一次性使用卫生用品的检测结果表明,按照GB15979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》规定的细菌检验方法与均质器处理法相比。